Антитела к вирусной диарее КРС (ИФА) от 5 проб

Описание исследования

Исследование проводится при единовременно сданной партии проб не менее 5 шт.

Цель исследования:
Тест предназначен для выявления в организме крупного рогатого скота специфических антител к белку р80 вируса БВД (бычьей вирусной диареи) КРС.
Преимущество данного теста состоит в возможности проводить как эпидемиологическое исследование популяции животных (установление доли положительно реагирующих в гомогенной группе животных), так и диагностическое (установление наличия хотя бы одного положительно реагирующего животного в популяции). Оба вида исследований проводятся по пулированным образцам крови.
Результат оценивается в % ингибирования.

Метод исследования:
Конкурентный твердофазный иммуноферментный анализ;

Требование к биоматериалу

Требования к взятию материала: 1. Сыворотка. Кровь в пробирке для биохимии (с активатором свертывания или гранулами) или пустой пробирке - мин. объем 1 мл, или сыворотка- мин.объем 150 мкл. Без признаков гемолиза и бактериальной контаминации 2. Плазма. Кровь в пробирке с ЭДТА - мин.объем 1 мл, или плазма - мин. объем 150 мкл. Без признаков гемолиза и бактериальной контаминации 3. Молоко, индивидуальные пробы. Объем не менее 5 мл. Для исследования в эпидемиологических или диагностических целях допустимо формировать пул биоматериала одного вида от животных одного хозяйства, содержащихся совместно продолжительное время. 1. Плазма или сыворотка сливные (пулированные) пробы. – допустимо от 2-х до 20-ти индивидуальных образцов в пуле, минимальный объем индивидуального образца – не менее 200-500 мкл. Пул формируется из РАВНЫХ объемов индивидуальных образцов. 2. Молоко, сливные (пулированные) пробы – допустимо до 20 индивидуальных образцов в пуле, минимальный объем индивидуального образца – не менее 5мл. Пул формируется из РАВНЫХ объемов индивидуальных образцов. Доставка проб в лабораторию: - цельная проба крови (то есть не центрифугированная и не разделенная на кровь и сыворотку/плазму) должна быть доставлена в лабораторный офис в течение 2-х часов после взятия при условии хранения при +15-+25 ⁰С; - сыворотку/плазму отделить центрифугированием необходимо в течение 2-х часов после взятия, в таком виде можно транспортировать пробу до 8 дней при хранении в условиях +2-+8 ⁰С; - пробы молока должны быть доставлена в лабораторный офис в течение 8 дней после взятия при условии хранения при +2-+8 ⁰С.

Диагностическая информация

Диагностическая значимость: ИФА-диагностику БВД используют в следующих целях: - выявление циркулирующего вируса - раннее обнаружение иммунорезистентных инфицированных животных - мониторинг стада после удаления иммунорезистентных инфицированных животных - проведение эпидемиологических исследований Возможности диагностикума: - исследование индивидуальных сывороток позволяет выявить отрицательных, слабоположительных и сильно-положительных животных - исследование пулов сывороток (от 2 до 20 голов в пуле) в эпидемиологических целях позволяет выявить наличие/отсутствие риска циркуляции вируса в группе (выявить наличие иммунорезистентных инфицированных животных) - исследование пулов сывороток (от 2 до 20 голов в пуле) в диагностических целях позволяет выявить инфицированные/неинфицированные группы животных - исследование индивидуальных проб молока позволяет выявить отрицательных и положительных животных - исследование пулов молока (от 2 до 20 голов в пуле) позволяет выявить группы: отрицательные (<10% вирусоносителей в группе), слабо-положительные (от 10 до 30% вирусоносителей в группе) и сильно-положительные группы (>30% вирусоносителей в группе). Исследуя индивидуальные сыворотки невозможно дифференциировать поствакцинальный уровень антител от патогенетического. Но на уровне стада такое различие может быть обнаружено. Различие нарастает по мере развития заболевания (на начальных этапах оно незначительно). Нарастание уровня поствакцинальных антител носит временный характер, патогенетических – постоянный. Самое активное образование поствакцинальных антител наблюдается после применения вакцины Pregsure BVDV. Уровень поствакцинальных антител (при применении инактивированных вакцин) всегда ниже уровня антител, наблюдаемого при протекании заболевания. Хотя неструктурный белок p80 (NS3) характерен именно для активной фазы инфекции (отщепляется от предшественника, белка NS2-3, в период встраивания вируса в клеточную мРНК и начала репликации), и в составе инактивированных вакцин обнаруживается лишь в следовых количествах, тем не менее антитела к нему обнаруживаются сразу после проведения иммунизации. Диагноз и дифференциальный диагноз по данным эпизоотологического анализа, клиническим и патологоанатомическим признакам практически поставить невозможно ввиду разнообразия проявления вирусной диареи и сходства со многими патологическими явлениями различной этиологии, наблюдаемыми у крупного рогатого скота. Лишь в качестве подозрения следует учитывать быстрое распространение в стаде заболевания, сопровождающегося лихорадкой, диареей, эрозиями в ротовой полости и ранней лейкопенией. Основу диагностики составляют лабораторные методы идентификации вируса, а клинические показатели могут являться лишь подспорьем для ускоренного диагноза их во вторичных случаях. Для прижизненного выделения вируса диареи в период лихорадки и выраженного клинического течения болезни берут носовые, глоточные смывы, фекалии, кровь, а из патологического материала— кусочки пораженных отделов пищеварительного тракта, брыжеечных и заглоточных лимфоузлов и исследуют методом ПЦР. Для характеристики истинного распространения возбудителя и бессимптомных форм течения болезни ретроспективный диагноз ставят на основании иммунологических исследований (ИФА). Рекомендуется брать парные сыворотки, полученные с интервалом в 1 неделю. При дифференциации вирусной диареи необходимо исключить чуму крупного рогатого скота, инфекционный ринотрахеит, злокачественную катаральную горячку, паратуберкулезный энтерит. Кроме перечисленных болезней, сходные симптомы наблюдаются при эфемерной лихорадке, ящуре, транспортной лихорадке — парагриппе-3, болезнях Ибараки и Акабане, диареях молодняка корона-, ротавирусной природы, некро- и колибактериозе, гиперкератозе, алиментарных отравлениях. Необходимо учитывать вероятность смешанного течения вирусной диареи с пневмоэнтеритами вирусобактериальной этиологии.