Комби: ПЦР+ АТ к вирусу лейкоза КРС

Описание исследования

Комплексное исследование на лейкоз КРС включает в себя:
4206  Лейкоз КРС методом  ПЦР (Определение наличия в образце провирусной ДНК вирусного лейкоза КРС.)
4208  Определение наличия антител к вирусу лейкоза КРС методом ИФА

Подготовка к исследованию

Материал: цельная кровь с К3ЭДТА не менее 1-2 мл, гемолиз ВЛИЯЕТ на результат. пробы молока, молозива и секрета вымени сухостойных коров не менее 5 мл Хранение пробы: Пробы крови допустимо хранить одни сутки в холодильнике, Сыворотку/плазму – до 3-х дней в холодильнике; Для более длительного хранения пробы сыворотки/плазмы замораживаются. Пробы молока, молозива и секрета вымени сухостойных коров допускается храненить при температуре +2-+8 ⁰С в течение 72 ч.

Требование к биоматериалу

Данный комплекс может быть использован для постановки диагноза, а так же , для оздоровления стада. 1) Постановка диагноза. Методом иммуноферментного анализа (ИФА) выявляется продукция организмом специфических антител, в ответ на пожизненно персистирующего возбудителя в организме животного в виде провируса, интегрированного в геном лимфоцитов хозяина. Метод ПЦР. Реакция позволяет обнаружить провирусную ДНК в патологическом материале через две недели после заражения. Применение данного метода целесообразно для подтверждения положительных результатов серологических методов исследования, а так же для исследования животных в периоды, когда уровень специфических антител может оказаться неинформативным, а именно: у телят в возрасте от 15 дней до 5 месяцев, у коров в пред- и послеродовой период до 30 суток, у особей со вторичными иммунодефицитами, инфицированных некоторыми инфекционными и инвазивными заболеваниями, у всего поголовья после применения живых вакцин, у особей, подозреваемых в заражении вирусом за 1-1,5 месяца до времени серологического контроля. С помощью ПЦР выявляют непосредственно провирус, то есть результат анализа не зависит от возраста и состояния животного, поэтому ПЦР можно использовать для разделения телят на инфицированных и здоровых в возрасте от 15 дней до 5 месяцев (в этом возрасте применять РИД или ИФА не имеет смысла) 2) Для оздоровления стада: Для полного оздоровления стада от лейкоза целесообразно совместно с ИФА использовать метод ПЦР, выявляющий провирус у инфицированных животных. Система ИФА+ПЦР перспективна при лейкозе КРС, так как обладает рядом преимуществ перед РИД и позволяет с высокой достоверностью одномоментно выявлять максимальное количество инфицированных животных на самых ранних стадиях заболевания. Это существенно сокращает сроки оздоровительных противолейкозных мероприятий. Кроме того, ПЦР применима для обследования молодняка, начиная с 15-дневного возраста. Недостаток в чувствительности ИФА особенно очевиден, когда животные, заражаясь вирусом лейкоза за 1-1,5 месяцев до времени серологического контроля, и в ИФА реагируют отрицательно. Первое исследование согласно инструкции проводят в 6 месяцев. До этого всех телят содержат в одной группе, и вероятность перезаражения очевидна (вакцинация, лечения без замены игл, с нарушением целостности кожи, слизывание воспалительного экссудата). Однако если теленок заразился в 5 месяцев, то к моменту исследования (6 месяцев) титр антител еще не успевает достичь диагностического уровня и он как серонегативный поступает в группу здоровых. Аналогичная ситуация может сложиться и при дальнейшем исследовании в 12, 18 и 24 месяцев, а затем и взрослого поголовья коров. Если в одной группе находятся инфицированные и здоровые животные, о чем врач может и не знать, то вероятность заражения весьма велика.