Кампилобактериоз (Campylobacter spp/Campylobacter jejuni) ПЦР

Описание исследования

Анализ позволяет дифференциовать ДНК Campylobacter spp и ДНК Campylobacter jejuni методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.

Исследование предназначено для следующих видов животных:
- собаки, кошки, лошади,  с/х животные, птицы, рептилии

Кампилобактериоз  –   острая   зоонозная   инфекция,   вызываемая   энтеробактериями Campylobacter   и   протекающая   с   преимущественным   поражением   пищеварительноготракта. Локализованная форма кампилобактериоза в большинстве случаев протекает по типу гастроэнтерита или гастроэнтероколита; генерализованная форма сопровождается развитием септицемии или септикопиемии.

Наибольшую значимость в этиологии и патогенезе кампилобактериоза животных имеют C.coli, C.jejuni (вызывают   большинство   случаев   диарейных   форм   инфекции), C.laridis, C.fetus (гематогенно-диссеминированные формы заболевания)

Кампилобактериоз (вибриоз) — у крупного рогатого скота и овец, проявляется поражением половых органов, частыми перегулами, бесплодием, массовыми абортами и рождением нежизнеспособного приплода. Эпизоотологические данные.

Источником кампилобактериоза являются птицы многих видов. Большинство птиц являются носителями Campylobacter jejuni, но в некоторых случаях инфицирование приводит к развитию у них энтерогепатита и диареи.

Опасность для здоровья человека: потенциально опасна, животные выделяющие данный микроорганизм в больших количествах во внешнюю среду могут быть источником инфекции у человека (особенно у детей и у всех людей с ослабленным иммунитетом.

Подготовка к исследованию

Требования к пробе: Рекомендованный материал: - смыв из прямой кишки в пробирку типа Эппендорф+0,5 мл физ. раствора; - молоко, мин.5 мл, в чистой пробирке или шприце; - эякулят, мин. 0,5 мл в пробирке типа Эппендорф; - от абортированных плодов: фрагмент плаценты, паренхиматозные органы, содержимое желудка/брюшной полости. - кал в контейнере - допускается для ПТИЦ и РЕПТИЛИЙ Возможно исследование - венозной крови в пробирке с антикоагулянтом ЭДТА - мин. объем - 2 мл; - кровь с гепарином не подходит для исследований методом ПЦР! Взятие материала: - ректальный смыв берется с использовнаием стерильных зондов с ватными тампонами и стерильных пробирок объемом типа Эппендор на 1,5 мл, содержащие 300-500 мкл стерильного физиологического раствора. а) При наличии загрязнений на поверхности анального отверстия убрать их стерильной салфеткой смоченной физиологическим раствором. б) Подготовить (зафиксировать) животное к взятию биоматериала, обеспечить доступ к анальному отверстию. в) Извлечь зонд-тампон из упаковки. Держать его в руках и НИЧЕГО им не касаться. г) Зонд смочить в жидкости и отжать влагу, прислоняя ватный наконечник к внутренней стенке пробирки. д) Зонд ввести в анальное отверстие на глубину 1-2 см для кошек и щенков, на 1см для котят, на 3-4 см для крупных собак. Вращательным движением, держа зонд-тампон под небольшим углом к стенке прямой кишки собрать материал со слизистой киешечника. е) Тщательно прополоскать зонд в пробирке и аккуратно отжать лишнюю влагу, прижимая наконечник к внутренней стенке пробирки. Повторить данную процедуру еще 1 раз. ж) Извлечь зонд из пробирки с транспортной средой, плотно закрыть крышку пробирки, зонд поместить в контейнер с дезинфицирующим раствором. з) Пробирку промаркировать. Правила отбора проб для исследования: 1) Лимфоузлы берут целиком. 2) Жидкости для исследования, кроме молока, отбирают в объеме 5 - 10 мл в стерильные контейнеры. 3) Из органов и тканей вырезают кусочки не более 5 х 5 х 5 см, каждый орган помещается в отдельный герметичный пакет, подписывается. Органы, расфасованные в пакеты, от одного животного складываются в общий пакет и маркируются идентификатором животного. Доставляются в лабораторию в течение 2-х часов после отбора. При не возможности соблюсти данное требование, отобранный пат материал замораживается и через 1 сутки в замороженном виде доставляется в лабораторию, размораживание при транспортировке не допускается. 4) Молоко. Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждой доли вымени берут последние порции молока в количестве 10 - 15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.У собак при взятии проб молока соски обмывают теплой водой и обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждого соска сцеживают около 0,5-1 мл молока в стерильнуюпробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. У овец и коз пробы молока берут путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска и после попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. Молоко должно быть доставлено в лабораторию в день взятия пробы. 5) Абортированные плоды весом до 1 кг берется целиком. Плод помещается в отдельный чистый пакет, маркируется. Если вес плода более 1 кг, то необходимо провести вскрытие плода и взятие органов для исследования. КАТЕГОРИЧЕСКИ запрещено: оставлять ватные зонды в пробирке при предоставлении проб в лабораторию Хранение и доставка: Материал для анализов доставляется в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя их при +2-+8⁰С. Допускается однократное замораживание пат.материала при -16⁰С на 30 дней.

Требование к биоматериалу

Рекомендовано дифференцировать от сальмонеллёза КОД 022 Сальмонеллез с дифференцировкой (Salmonella spp., S. typhimurium, S. enteritidis) йерсиниоза КОД 067 Йерсиниоз (ПЦР) хеликобактериоза КОД 026 Helicobacter pylori (ПЦР)