Клостридиоз/Энтеротоксин ( Clostridium difficile / Clostridium perfringens/ Энтеротоксин Cl. perfringens) ПЦР
Описание исследования
Анализ позволяет дифференциовать ДНК Clostridium difficile, ДНК Clostridium perfringens и ДНК гена CPE Clostridium perfringens, кодирующего энтеротоксин методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.
Клостридиозы — это токсикоинфекции, фактором патогенности которых являются выделяемые токсины. Характерной особенностью возбудителей клостридиозов является их полипатогенность. Они поражают как людей, так и сельскохозяйственных, домашних и диких животных.
Особую опасность представляют ботулизм (C. botulinum), столбняк(C. teteni), газовая гангрена ( C.perfringens), анаэробная энтеротоксемия (С. рerfringens, C.difficile).
1. Клостридиозы распространены повсеместно. Встречаются в составе нормальной микрофлоры кишечника животных и не вырабатывают токсинов, которые могут приводит к токсикоинфекции.
2. Переносчиками клостридиозов выступают, млекопитающие, птицы, рептилии, членистоногие, экзотические животные.
3. Патогенные клостридии подразделяют на нейротоксические, гистотоксигенные и энтеротоксемические.
Энтеротоксемические виды клостридий выделяют токсины разных типов и вызывают диарейные заболевания у людей и животных, при этом мелкие домашние и экзотические животные не имеют специфической защиты против Clostridium perfringens и Clostridium difficile. Энтеротоксин C perfringens (CPE) является основным токсином, Cl. perfringens типа А, вызывает заболевания ЖКТ и связан с непищевыми диарейными заболеваниями у разных животных.
4. Необходимость определения патогенных клостридий у домашних животных связана с их высокой эпизоотологической опасностью для самих животных и хозяина-человека.
Пути передачи.
Кишечный клостридиоз встречается в виде как спорадических заболеваний, так и эпидемических вспышек.
Источником инфекции являются человек и животные. Заражение происходит алиментарным путем
Требование к биоматериалу
Животные: Млекопитающие (с\х животные, собаки, кошки, грызуны, человек), птицы(дикая, домашняя, зоопарковая птица), экзотические животные, рептилии, членистоногие Материал: Фекалии - птица, рептилии, грызуны Мазок со слизистой оболочки прямой кишки - все остальные животные. Аутопсийный и биопсийный материал (пат.органы (мыщцы, кишечник, селезенка) при падеже или диагностическом вскрытии) Хранение: Фекалии, аутопсийный и биопсийный материал - в охлажденном виде (+2 - +8) - 1 сутки. Мазок со слизистой оболочки прямой кишки - в охлажденном виде (+2 - +8) - 2 суток Более длительное хранение, кроме фекалий, возможно в замороженном виде при -20. Траспортировка в замороженном виде.
Диагностическая информация
Clostridium difficile - это грамположительная, анаэробная, образующая споры подвижная палочковая бактерия, которая обычно обитает в кишечном тракте многих видов млекопитающих, рептилий и птиц. Она также найдена в окружающей среде. Имеет более 400 уникальных типов и несколько факторов вирулентности. Экзотоксины А и В являются наиболее значимыми факторами, и бактериальная продукция экзотоксинов коррелирует с патогенностью отдельных штаммов C. difficile. Токсин А является энтеротоксином, способствующим выделению жидкости из слизистой оболочки кишечника, и действует синергетически с цитотоксическим токсином В через прикрепление к специфическим рецепторам на поверхности энтероцитов. Совместное действие этих токсинов приводит к некрозу поверхностного эпителия и отекам в пораженных участках кишечника. Clostridium perfringens - это грамположительная, палочковидная, анаэробная, спорообразующая бактерия, которая является нормальным компонентом разлагающейся растительности, морских отложений, кишечного тракта человека и других позвоночных, насекомых и почвы. Инфекции, вызванные C. perfringens, могут привести к некрозу тканей, бактериемии, эмфизематозному холециститу и газовой гангрене. Бактерии могут секретировать α-токсин, что приводит к образованию гангрены. Если бактерии попадают внутрь, это может привести к коликам и диарее
Материал
aМазок в пробирку со средой Кери-Блера
bМазок в пробирку со средой Эймса (Стюарта)
eСмывы со слизистых в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
fКал в контейнере с ложечкой
gСодержимое желудка 10-30 мл
iКровь 2-3 мл. на фильтр-бумаге, высушенная для генетических исследований
kОбразец тканей в контейнере с 10% раствором формалина
lМатериал берется только в лаборатории!
mМазок на стекло
nМолоко в контейнере 10-30 мл
pКровь в пробирку с К3ЭДТА (К2ЭДТА)
sКровь в пробирку для получения сыворотки/сыворотка
tКлещ (не более 2 шт.), плотно закрытая сухая пробирка типа Эппендорф
uМоча во флаконе 5 - 10 мл
vВыпоты или биологические жидкости в контейнере или в шприце
wВолос (шерсть) в пробирке Эппендорфа
xСмывы буккального эпителия
zБиопсийный эндоскопический материал в 10% растворе формалина. До 10 фрагментов с одной локации.
rРектальный смыв в пробирку Эппендорфа (с физрастворм 0,5 мл)
оМазок-отпечаток на стекло
c Паренхиматозные органы в герметичном пакете
hКровь в пробирку для определения гемостаза (цитрат Na 3,8%)
jЭякулят в стерильном контейнере
qБронхо-альвеолярный лаваж в контейнере или шприце (5-10 мл)
yБиоптат слизистой желудка в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
смотри специальные условия на сайте