Лейкоз КРС (ПЦР)

Описание исследования

Тест может использоваться для подтверждения результатов, полученных экспресс методами, а также для верификации сомнительных результатов, полученных другими методами (РИД, ИФА)

Цель Исследования:
Выявление ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота (bovine leukemia virus), выделенной из биологического материала животных.

Метод исследования:
ПЦР в режиме реального времени.

Форма выдачи результата: Качественная (Положительно/Отрицательно)

Виды животных:  только КРС (крупный рогатый скот)

Подготовка к исследованию

Виды исследуемого материала: 1. Кровь с К3ЭДТА для животных старше 14 дней. 2. Паренхиматозные органы (лимфатические узлы, селезёнка) Правила отбора и хранения проб для исследования: 1. Кровь рекомендуется брать с помощью вакуум-содержащих систем, допустимо хранение в холодильной камере в течение суток при температуре от 2 °С до 8 °С. 2. Из органов и тканей вырезают кусочки не более 5 х 5 х 5 см, каждый орган помещается в отдельный герметичный пакет, подписывается. Органы, расфасованные в пакеты, от одного животного складываются в общий пакет и маркируются идентификатором животного. Доставляются в лабораторию в течение 2-х часов после отбора. При не возможности соблюсти данное требование, отобранный пат материал замораживается и через 1 сутки в замороженном виде доставляется в лабораторию, размораживание при транспортировке не допускается.

Требование к биоматериалу

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ И ТЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ Лейкоз крупного рогатого скота – хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, которая протекает бессимптомно или проявляется лимфоцитозом и злокачественными разрастаниями клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, в результате чего происходит диффузная инфильтрация органов этими клетками или появляются опухоли. Возбудителем лейкоза крупного рогатого скота является РНК–содержащий вирус семейства Retroviridae, классифицированный по морфологическим признакам как онковирус типа С млекопитающих, местом обитания и размножения которого являются лимфоциты. Клинические признаки.В настоящее время нет пород крупного рогатого скота, абсолютно устойчивых к заражению вирусом лейкоза КРС и заболеванию лейкозом. Различают две формы клинического течения болезни: энзоотическую и спорадическую. Спорадический лейкоз встречается редко и в экономическом отношении малоактуален. Поражается молодняк до трех лет. Болезнь протекает в трех формах: ювенальной, тимусной и кожной. Энзоотический лейкоз: Эпизоотический процесс лейкоза является сложным непрерывным процессом передачи ВЛКРС от зараженных к восприимчивым здоровым животным. Имеются два пути передачи вируса: вертикальный (внутриутробный) и горизонтальный (контактный). Заражение происходит обычно горизонтально, то есть в результате ввода здоровых животных в стадо, инфицированное ВЛКРС, и в здоровых стадах – путем ввода в них животных, зараженных вирусом лейкоза. Горизонтальный путь не исключает передачу вируса через быков-производителей как возможных источников передачи лейкозной инфекции при вольной случке коров и телок. Выявление в хозяйствах инфицированных быков-производителей служит лакмусовой бумажкой, указывающей на обязательное наличие в стаде инфицированных вирусом коров и телок, поскольку достоверно доказано, что при случке здоровых животных с быком, инфицированным вирусом лейкоза, можно распространить инфекцию. И наоборот, когда здоровый бык используется в неблагополучном хозяйстве, он инфицируется вирусом лейкоза и становится распространителем данной инфекции. Установлено, что отсутствие быков в современных стадах приводит к «нетрадиционным» играм коров и телок в состоянии охоты. Запрыгивания друг на друга часто приводят к повреждению кожного покрова на корне хвоста, маклоке и грудине возбужденных животных. Если в числе трущихся животных окажется вирусоноситель лейкоза, через кровь на ранах и царапинах заражение в состоянии охоты обеспечено. Этот фактор горизонтальной передачи ВЛКРС не учитывается современной эпизоотологией лейкозов. ВЛКРС может передаваться трансплацентарно с инфицированными лимфоцитами матери благодаря способности лимфоцитов мигрировать в межклеточном пространстве и таким образом преодолевать плацентарный барьер. По некоторым данным, до 20 % телят, зараженных вирусом ВЛКРС от матерей, могут рождаться инфицированными. Вирус лейкоза присутствует в молозиве и молоке инфицированных коров. Инокуляция такого молока или молозива телятам и овцам индуцирует у них инфекцию. Учитывая, что ВЛКРС передается только с лимфоцитом, вне которого он не может существовать, то пути передачи лимфоцитов, несущих в себе этот вирус – это все ветеринарно-зоотехнические мероприятия с животными, выполняемые с нарушением правил асептики, в частности – искусственное осеменение коров и телок, отбор проб крови для диагностических исследований, массовые вакцинации, ректальное исследование, хирургические обработки копыт, использование общих родильных отделений для инфицированных ВЛКРС и неинфицированных рожениц, через доильные аппараты, особенно в случаях доения коров со скрытыми и, тем более, клиническими маститами, а также при нестабильных параметрах в доильной системе, использование быков-производителей (для вольной случки), инфицированных вирусом лейкоза. Локализация вируса. Вирус локализуется в лимфоидных клетках разных органов, где сохраняется пожизненно (персистирует). В инфицированных лимфоцитах в форме провируса(непродуктивное состояние) вирус защищен от действия вируснейтрализующих антител и может передаваться потомству во время деления клеток. Провирус может изменять экспрессию генов клетки, что приводит к ее трансформации и развитию опухолевой стадии лейкоза. Постоянным признаком инфекции служит продукция специфических антител. Источник инфекции — больные животные. Возбудитель передается со всеми секретами и экскретами, содержащими зараженные вирусом лейкоциты (кровь, молоко, молозиво, сперма, носовая и влагалищная слизь, слюна). Чаще всего вирус передается с кровью. Наибольшую опасность с точки зрения распространения инфекции представляют животные с персистентным лимфоцитозом, у которых доля инфицированных лимфоцитов в периферической крови значительно выше, чем у животных инфицированных, но не достигших гематологической стадии заболевания. Основной путь передачи инфекции в естественных условиях через контаминированные вирусом инъекционные иглы, хирургические инструменты и т. д. при проведении санитарно-ветеринарных мероприятий. Кроме того, вирус может передаваться трансплацентарно (хромосомная или экстрахромосомная трансмиссия) от матери к плоду, алиментарно через молоко и молозиво, а также половым путем через инфицированную сперму. Распространяться инфекция может и кровососущими насекомыми.